高壓蒸汽滅菌器在使用時，一定將滅菌器中的冷空氣排除干凈。因為空氣的膨脹壓力大于水蒸氣的膨脹壓力，當水蒸氣中含有空氣時，壓力表上所示的壓力不是水蒸氣的實際壓力，而是水蒸氣壓力和空氣壓力的和。因為在相同的壓力下，含空氣的蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度，所以當滅菌器加熱達到需要的滅菌壓力時，如果含有空氣，滅菌器內達不到所需的滅菌溫度，就達不到應有的滅菌效果。